May 19, 2015 · Here are some key considerations: General Concentration Range: For HEK 293 cells, the puromycin concentration commonly used for selection ranges from 1 to 10 µg/mL. However, the optimal...

HEK293 became suspension cells after puromycin treatment. Some details: At first, I tried the puromycin concentration (2.5 ug/mL) recommended by the postdoc in my lab. A majority of cells...

Puromycin resistant 293T stable cell line - can anyone help? I am trying to make a stable cell line that expresses my protein of interest. I have the gene of my protein in a vector that...

Transfection and selection data of 293T cells by various antibiotics in differing media.

5 days ago · VectorBuilder offers a variety of drug-selection markers on its vectors, such as puromycin (Puro), neomycin (Neo), hygromycin B (Hygro) and blasticidin (Bsd). In general, we have found that puromycin kills non-resistant cells faster and …

嘌呤霉素（Puromycin）是一种由白黑链霉菌产生的氨基苷类抗生素。 其可以打乱核糖体上的肽转运，造成翻译过程中不成熟链终止，从而抑制蛋白质合成。 在原核和真核细胞中，嘌呤霉素都是强效翻译抑制剂。 链霉菌中的嘌呤霉素N-乙酰转移酶基因（pac）可使机体对嘌呤霉素耐药。 嘌呤霉素作用迅速，在低浓度下即可快速导致细胞死亡。 贴壁哺乳细胞对浓度为2-5 µg/ml的嘌呤霉素较为敏感，而悬浮细胞对浓度低至0.5-2 µg/ml的嘌呤霉素已经很敏感。 对嘌呤霉素稳定耐药的哺 …

Aug 29, 2013 · 兄弟想用293T细胞做一个3xFlag标签质粒的稳定表达系，能找出单克隆最好，不是不行，混合克隆也能用，但是不知道293T对于Puro的耐受浓度是多少，哪位兄弟姐妹做过，说说勇夺撒浓度筛选比较好？

3. Puro HEK-293 Cell Line 细胞冻存 a) 使用800 rpm，3 min 离心收集细胞。 b) 使用预冷细胞冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，细胞密度调整为5 × 106 cells/mL，每管1 mL分装到细胞冻存管中。 c) 拧紧盖子，适当标记后，将冻存管置于梯度降温盒中，-80℃下保存至少1天，尽

Oct 25, 2017 · 空白对照组的细胞两天差不多都死光了，但是实验组都是三天之后开始增长变慢，每次传完之后都有飘的细胞而且越来越多，细胞形态也逐渐发生变化，到七天差不多都不长了。 中间收过细胞跑RT，也敲下去了，就是最后细胞越长越残越来越不行。 换过几种细胞系都这样，甚至293t也是这样，基因不是essential的，筛选以及后续培养过程也提高了FBS的浓度，还是这样。 真的不知道原因在哪里，反复折腾都快半年了，很绝望，有前辈能提点意见么T T. 求问 …

采用独家细胞筛选技术确保表达量高，提供RT-qPCR验证数据。 基因拷贝数稳定，细胞代次低，能够稳定传代20代以上。 执行严格的质量控制，确保无细菌支原体污染，并通过STR身份验证以及细胞复苏活率测试，高标准交付。